尼帕病毒综合防治知识

尼帕病毒病是由尼帕病毒（Nipahvirus,NiV）引起的一种具有高致病性、高致死率的烈性人兽共患病。果蝠是尼帕病毒的主要天然宿主，与受感染果蝠和其中间宿主猪的接触是人类感染尼帕病毒的主要原因。该病主要以高热、呼吸困难、头痛并且伴随脑炎、癫痫等并发症为主要临床特征。尼帕病毒病最初于1998年在马来西亚出现，当时养猪业出现了大规模的呼吸道疾病及脑炎，最终导致100多人的死亡。随后自2001年以来，几乎每年都暴发尼帕病毒感染。尼帕病毒主要发生在孟加拉国、印度，2013年初的暴发导致了12例病例中有10例死亡。尼帕病毒病还具有非常强的跨物种威胁，自然和实验感染都证明了它们能够感染马、猪、猫、犬、雪貂、仓鼠、豚鼠、猴子和人类，跨越了6种哺乳动物目。目前，仍然缺乏针对尼帕病毒病的有效疫苗及治疗方法，其防控措施主要是防止其间接宿主与果蝠及果蝠栖息地的接触。

1998年，马来西亚的猪群和人群中暴发了一种不明原因脑炎，以急性发热型脑炎与高死亡率为特征，患者多与养猪业密切相关。直到1999年3月，马来西亚科学家首次从森美兰州尼帕镇的患者脑脊液中分离到一种新病毒，后经美国CDC确认为一种新的副黏病毒，由于分离病毒的标本来自尼帕镇，被命名为尼帕病毒（Nipahvirus，NiV）。

1998年，马来西亚发生了NVD暴发疫情。此后20年内全球报告了19起大小不等的NVD暴发，共报告643例病例，380例死亡，病死率为59.1%。

感染后不出现明显症状的狐蝠科果蝠是NiV的天然宿主。研究亦表明，NiV的地理分布与狐蝠科的地理分布重叠，如猪、马、山羊、绵羊、猫和狗等家养动物也是NiV自然宿主，其感染后具有传染性，其中猪是NiV主要传染源，其他自然宿主还有猎犬及鼠类等。在疫情中也多次出现了人传人现象，患者及感染者也是重要的传染源。

NiV在动物间及动物与人之间的传播方式尚不完全明确。目前传播方式有3种：一是无保护性地接触猪的分泌物或患病动物的组织；二是食用被携带NiV蝙蝠分泌物污染的水果或水果制品（例如生椰枣汁）是最可能的感染途径；三是密切接触人的分泌物和排泄物导致人-人之间传播，多发生于家人和照护人员或者医务人员中。目前研究尚无证据显示NVD可通过进食烹调过的猪肉引起传染。

人群普遍易感，特别是与NiV感染猪直接接触的工作人员最易感，如猪场的兽医、饲养人员、污物处理人员及屠宰场工人等。

尽管NVD流行主要局限在东南亚和南亚的5个国家与地区，但是NVD具有明显的季节性分布特征，如孟加拉国NVD暴发多发生在每年1-5月，可能与蝙蝠繁殖、人类活动以及枣椰树果子成熟季节有关。马来西亚暴发的NVD引起的病毒性脑炎研究资料显示，患者多为成年男性，年龄13~68岁，平均37岁，男女性比例为4.5∶1。其中93%的患者与猪有密切接触史。

NiV感染与流行的主要危险因素与宿主、人类暴露方式和暴露时间、病例是否出现呼吸道症状、病毒复制以及毒株变异等因素有关。

根据WHO报告，尼帕病毒感染的潜伏期（从感染到出现症状的时间间隔）为4~14d，但是，曾有过潜伏期长达45d的报告。人类感染尼帕病毒的临床谱非常广泛：从无症状（亚临床）感染到轻微或严重的急性呼吸道感染和致命性脑炎、脑水肿，甚至死亡。人类感染尼帕病毒初期症状与流感相似，表现为发热、头痛、肌痛、咽痛、呕吐等症状。随后可能出现头晕、嗜睡、意识混乱和急性脑炎的神经系统症状与体征。有些人还可能出现非典型肺炎和严重呼吸系统并发症，包括急性呼吸窘迫。严重病例会发生脑炎和癫痫，进而在24-48h内陷入昏迷状态。尼帕病毒重症患者可出现败血症、胃肠道出血、肾损害等并发症，还可出现肺栓塞、房颤，但较少见。病死率估计为40%~75%，大多数患者发病后3~14d死亡，主要死因是脑炎，1/3患者会在昏睡中死亡。

NiV感染猪没有特征性病变，肺和脑膜是主要的病变器官。大多数病例表现由轻微到严重的肺部病变，包括程度不同的实变、气肿、淤血性溢血以及呼吸道有带血丝的分泌物，切开肺部，可见肺小叶间隔肿胀。脑膜弥漫性充血、水肿，其他的内脏器官没有明显变化。

尼帕病毒感染的急性发作期以及恢复期，可采用不同的检测方法进行诊断。疾病早期阶段，可采集咽拭子、鼻拭子、脑脊液、尿液和血液，RT-PCR进行检测；在疾病病程后期和恢复期，可用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行抗体检测。目前尼帕病毒感染实验室诊断主要有以下几种方法：

采集患者的呼吸道标本、脑脊液、尿液和其他的组织标本，接种Vero、BHK、PS等细胞或其他敏感细胞，通常在细胞染毒后3~5d可出现明显的细胞病变：感染细胞形成大合胞体，通过电镜或免疫电镜观察形态、免疫组化、特异性抗血清中和实验、细胞培养上清PCR等方法进行病毒鉴定。

RT-PCR由于其诊断速度快，并具有高度特异性与灵敏性，往往用于NiV感染的早期诊断，也是目前应用最广的方法。最常用的是美国CDC开发的一种基于N基因的RT-PCR检测方法。另外，2004年开发的基于N基因的荧光定量PCR法（TaqMan探针），灵敏性高达0~1pfu，在暴发诊断中应用最广。还有一种也是基于N基因的荧光定量PCR法（SYBR绿色荧光探针），尽管灵敏性只有100pfu，但是该方法可以同时检测亨德拉病毒。PCR阳性者可以进一步扩增全基因组或者是局部基因片段，通过二代测序对NiV的起源、变异与进化进行分析。

由于尼帕病毒复制的部位主要是在血管内皮，因此可以用免疫组织化学方法对各种组织，包括脑、肺、脾、肾脏和淋巴结、子宫及胎盘等进行尼帕病毒抗原检测。以前采用患者恢复期血清，现在多采用抗尼帕病毒兔血清进行免疫组化检测尼帕病毒抗原。

尼帕病毒感染急性期可以采集病例的血清或者脑脊液，检测尼帕病毒IgM抗体。在流行病学暴发调查人群免疫水平、监测以及动物宿主的确定等方面可检测尼帕病毒IgG抗体。由于ELISA方法具有高度敏感性、快速、易操作、安全，是目前尼帕病毒抗体最常用的方法。美国CDC开发了一种基于保守N蛋白的ELISA方法，可以检测NiV特异性IgM以及IgG抗体，这种方法在马来西亚暴发疫情确认以及孟加拉国疫情监测中发挥了重要作用。尼帕病毒中和抗体检测主要有3种，即空斑减少中和试验、微量中和试验以及免疫空斑试验。

上述尼帕病毒检测方法各有优点和缺点，灵敏度与特异度也不尽相同。

目前没有针对尼帕病毒病的特异性疫苗与药物。预防性措施主要以控制传染源、切断传播途径与保护易感人群为主。尼帕病毒感染者的临床治疗以生命支持与对症治疗为主，采取强化的支持性护理来治疗严重的呼吸系统和神经系统并发症。

猪是尼帕病毒重要的自然宿主。首先，在尼帕病毒病流行地区，建立一体化的人-动物-野生动物的健康监测系统，及时评估和持续性应急监测非常重要；其次，如发生尼帕病毒疫情，应立即关闭屠宰场，对动物养殖场所进行彻底的清洁、消毒、隔离、必要时宰杀受感染的动物并密切监督埋葬或焚烧尸体、疏散疫区居民、以减少向人类传播的风险；其三，严格禁止流行疫区的猪流向屠宰场或向其他的农场转移；其四，加强尼帕病毒疫情国的动物检验检疫，禁止病猪输入。

减少或预防人类尼帕病毒感染的唯一方法是提高人们对尼帕病毒感染风险因素的认识，并教育人们可以采取相应的措施来减少接触尼帕病毒。主要措施包括：①减少蝙蝠向人类传播的风险：首先着重减少蝙蝠与椰枣树汁和其他新鲜食品的接触。使用保护性覆盖物防止蝙蝠靠近椰枣树树汁液采集点。采集的新鲜椰枣汁应当煮沸，果实应该在食用前彻底清洗并去皮，以及不要食用有蝙蝠啃咬痕迹的水果。②减少动物向人类传播的风险：在处理患病的动物或其组织时应穿戴手套和防护服以避免与受感染的猪接触。在流行地区，建新养猪场时应考虑该地区是否存在果蝠。③降低人-人传播风险：应避免与尼帕病毒病患者进行无保护的密切身体接触，特别是与患者的血液、脑脊液、分泌物接触。在照顾或探望患者之后应常规洗手。采取相应的标准措施来控制尼帕病毒院内感染，如应由训练有素的工作人员在符合生物安全条件的实验室中对疑似病例和动物采样进行处理。

目前，尼帕病毒共有3种疫苗处在动物试验阶段，包括亚单位疫苗、病毒载体疫苗以及病毒颗粒疫苗。3种疫苗在不同的动物模型中证实，通过口/鼻单剂次的免疫便可产生良好的免疫保护，特别是亚单位疫苗对马有良好的保护。

1999年，在马来西亚的养猪场暴发的一次疫情中首次确认了尼帕病毒。自1999年以来，马来西亚未再报告过新疫情。

2001年，孟加拉国也确认了尼帕病毒，自那时以来该国几乎每年都发生疫情。在印度东部也定期发现该疾病。

其它区域也可能存在尼帕病毒感染风险，因为有证据表明，在已知的天然宿主狐蝠属蝙蝠以及柬埔寨、加纳、印度尼西亚、马达加斯加、菲律宾和泰国等一些国家的其它若干蝙蝠种类中存在尼帕病毒。